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    技術專欄

    實驗動物如何采血及采血管的選擇
    供稿:市場部發布時間:2023-07-27瀏覽量:756次

    實驗動物采血

    在實驗研究中,經常會采集實驗動物血液用于分析和評估動物體內的生理和病理情況。根據不同的實驗設計和要求及動物的特性和生理差異,選擇合適的采血方法,可以減少動物傷害,提高實驗的成功率和結果的可靠性。今天小編給大家普及下實驗動物采血方法及采血管的選擇。

     

    01 大鼠、小鼠采血方法

    尾尖采血(剪尾采血)

    采血方法:動物麻醉后并固定,將鼠尾在45-50℃溫水中浸泡數分鐘,也可用二甲苯等化學藥物涂擦,使局新血管擴張。擦干尾部,用酒精棉球消毒鼠尾,用無菌手術刀,快速截斷小鼠尾尖約1-2mm,可以從尾部向尾尖方向按摩,以增加血流。用毛細采血管收集血液,或直接滴入收集管中。采血結束后,用干棉球按壓傷口或使用止血劑來止血。

    應用:所需血量少的連續多次采次,此法每只鼠可采血10余次。常用于紅、白細胞計數、血紅蛋白測定、制作血涂片等。

    采血量:小鼠可每次采血約0.1ml,大鼠約0.4ml。

    優點:操作較簡單,動物不致死,可多次重復采血。

    缺點:取血量少,約0.1ml,采血速度慢,不適于樣本量大和需要較多血量的實驗;不適用于老齡鼠;按摩鼠尾時可能會增加溶血風險,易污染。

    頸靜脈采血

    采血方法:左手固定大鼠,使大鼠呈現腹部朝上的一個“十”字形,讓大鼠頸部依靠在保定器上,頸部與前肢呈大于90°角,用頭部固定器扭動頸部,使鎖骨出現一個三角窩,去除鎖骨附近被毛,酒精棉球擦拭消毒。右手持注射器,沿鎖骨處進針(去除毛發后可清晰可見靜脈處),刺穿皮膚后輕回拉注射器,使注射器產生負壓。大約30度向上進針,當注射器內有血液出現時說明已經刺入采血位置,保持注射器,回拉注射器完成采血。采血完成后用干棉球稍按壓止血即可。

    應用:適用于人手少、動物數量多、實驗時間緊以及藥代動力學等需連續少量取血的研究中。

    優點:相對于眼眶后靜脈叢采血法對動物造成的疼痛感更小,更加符合動物福利,所以現在大有取代眼眶后靜脈叢采血的趨勢。本法適用于大鼠。

    缺點:要求技術熟練,在一定時間內,如果采血量和采血次數增加,會使動物引起一定的應激性反應或采血部位的傷害。

    眼眶靜脈叢采血

    采血方法:動物麻醉后并放置動物臺上,用左手拇指和食指壓迫小鼠頸部兩側同時將皮膚向后拉(注意避免用力過度壓迫氣管),使眼球外突,提示眼眶后靜脈叢充血。右手拿一毛細管(建議采用0.5*100mm規格的毛細管,在使用前折成小段,每段大約3-4cm),置于內側眼角處,并且以與鼻翼平面成30-45度沿內眥插入內眼角,滑入眼球后方,輕輕向眼底方向刺入。不能刺地過深,一般小鼠2-3mm,大鼠4-5mm即可。當感到阻力時即停止推進,轉180°使斜面對著眼眶后界,即有血液流出。采血結束后,立即松開手指對小鼠的壓迫,使眼球復位,同時拔出毛細管??捎酶擅耷驂鹤⊙劭?,確保止血。

    應用:適用于需中等量血液、避免小鼠死亡的血液指標連續監測。

    優點:眼眶后靜脈叢采血法簡單,便于掌握,采血成功率高,小鼠死亡率低,血流較快。

    采血量:小鼠可采血約0.2-0.3ml,大鼠約0.4-0.6ml。

    缺點:采血后需要至少10天的組織修復過程,否則采血量產生一定影響;不能采集到無菌的血樣,血液中可能混有眼窩內的組織液和腺體分泌物,對于血樣要求較高的研究,應謹慎使用;易損傷眼球,易感染,造成失明。

    腹主動脈采血法

    采血方法:大鼠麻醉后仰臥固定在實驗臺上,將大鼠腹腔注射10%水合氯醛以0.03ml/kg麻醉5min即可。大鼠背部放置一粗試管以充分暴露腹主動脈,常規消毒后用手術剪刀沿腹正中線剪開腹腔。術后右手持穿刺針針尖斜面朝下入針角度約25°~30°朝向心端放向刺入,深度以5mm左右為宜,抽吸血液即可。

    采血量:大鼠可采血約8~10ml,一般采3種血樣全過程只需2min。

    優點:該采血法取血量大、不易溶血,血液質量較好,適用于多項目檢測,且不損傷器官,有利于病理組織學檢查。

    缺點:操作比較復雜,應注意掌握適宜的麻醉深度,防止心跳驟停,同時防止大鼠躁動。本方法造成的出血速度快,易造成出血性的心臟停跳,故要防止采血過程中出血。

     

    02 豚鼠采血方法

    耳緣切口采血:

    先將豚鼠耳消毒,用刀片沿血管方向割破耳緣,切口約長0.5cm,在切口邊緣涂上20%的檸檬酸鈉溶液,防治血凝,則血可自切口處流出。此法采血每次可采0.5ml。

    背中足靜脈采血:

    固定豚鼠,將其右或左后肢膝關節伸直,腳背消毒,找出足靜脈,左手拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手將注射針刺入靜脈,拔針后立即出血。

    心臟采血:

    用手指觸摸,選擇心跳最明顯的部位,把注射針刺入心臟,血液即流入針管。心臟采血時所用的針頭應細長些,以免發生采血后穿刺孔出血。

     

    03 兔的采血方法

    耳緣靜脈采血:

    將兔固定,拔去耳緣靜脈局部的被毛、消毒,用手指輕彈兔耳,使靜脈擴張,用針頭刺耳緣靜脈末端,或用刀片沿血管方向割破一小切口,血液即流出。本法為兔最常用的采血方法,可多次重復使用。

    耳中央動脈采血:

    在兔耳中央有一條較粗的、顏色較鮮紅的中央動脈。用左手固定兔耳,右手持注射器,在中央動脈的末端,沿著與動脈平行的向心方向刺入動脈,即可見血液進入針管。由于兔耳中央動脈容易痙攣,故抽血前必須讓兔耳充分充血,采血時動作要迅速。采血所用針頭不要太細,一般用6號針頭,針刺部位從中央動脈末端開始,不要在近耳根部采血。

    頸靜脈采血:

    采血量超過1ml時,頸靜脈是常用的采集部位。方法同大鼠頸靜脈采血。

    心臟采血:

    使家兔仰臥,穿刺部位在第三肋間胸骨左緣3mm處, 針頭刺入心臟后,持針手可感覺到兔心臟有節律的跳動。此時如還抽不到血,可以前后進退調節針頭的位置,注意切不可使針頭在胸腔內左右擺動,以防弄傷兔的心、肺。

     

    04 狗的采血方法

    后肢外側小隱靜脈采血:

    后肢外側小隱靜脈位于后肢脛部下三分之一的外側淺表皮下,由前側方向后行走。采血時,將動物固定,局部剪毛、消毒,采血者左手緊握剪毛區上部或扎緊止血帶,使下部靜脈充血,右手用連有6號或7號針頭的注射器刺入靜脈,左手放松,已適當速度抽血即可。

    前肢背側皮下頭靜脈采血:

    前肢背側皮下頭靜脈位于前腳爪的上方背側的正前位。采血方法同上。

    頸靜脈采血:

    前兩種方法需技術熟練,且不適于連續采血。大量或連續采血時,可采用頸靜脈采血,方法同小鼠、大鼠的頸靜脈采血方法。

    股動脈采血:

    本法為采取動脈血最常用的方法。操作簡便,稍加訓練的狗,在清醒狀態下將狗臥位固定于狗解剖臺上。伸展后肢向外伸直,暴露腹股溝三角動脈搏動的部位,剪毛、消毒,左手中指、食指探模股動脈跳動部位,并固定好血管,右手取連有5號半針頭的注射器,針頭由動脈跳動處直接刺入血管,若刺入動脈一般可見鮮紅血液流入注射器,有時還需微微轉動一下針頭或上下移動一下針頭,方見鮮紅血液流入。有時可能刺入靜脈,必須重抽。抽血畢,迅速拔出針頭,用干藥棉壓迫止血2-3分鐘。

    紅色頭蓋:普通血清管,采血管不含有任何添加劑,用于常規血清生化,血庫和血清學相關檢驗;

    桔紅色頭蓋:快速血清管,采血管內有促凝劑,加速凝血過程。適用于急診血清的化驗系列;

    金黃頭蓋:惰性分離膠促凝管,一般用于急診血清生化試驗;

    綠色頭蓋:肝素抗凝管,一般用于紅細胞壓積實驗,紅細胞脆性試驗,血氣分析,血沉及普通的生化測定;

    紫色頭蓋:又叫EDTA抗凝管,一般是用于普通的血液學檢測,但是不適用于凝血實驗及血小板功能的檢測,也不能用于鈉、鉀、鈣、鐵、堿性磷酸等的測定;

    淺藍色的頭蓋:枸櫞酸鈉,凝血實驗管;

    黑色頭蓋:枸櫞酸鈉血沉實驗管;

    灰色頭蓋:草酸鉀、氟化鈉,氟化鈉管,適用于血糖測定,一般不用于尿素酶法測定尿素,常用于血糖檢測。

     

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